動物疫病血凝分析儀

動物疫病血凝分析儀型號：DY-7000

試驗方法： 
1 血凝（HA）試驗 
1） 在V型微量反應板的1～12孔均孔加入0.025ml PBS，換滴頭。 
2） 吸取0.025ml血凝抗原加入*孔，混勻。 
3） 從第1孔吸取0.025ml血凝抗原加入第2孔，混勻后吸取0.025ml加入第3孔，如此進行對倍稀釋至第11孔，從第11孔吸取0.025ml棄去，換滴頭。 
4） 每孔再加0.025ml PBS。 
5） 每孔均加入0.025ml 1%（V/V）雞紅細胞懸液（將雞紅細胞懸液充分搖勻后加入）。 
6） 將反應板在振蕩器上震蕩1～2分鐘或輕扣反應板混合反應物，在室溫（20～25℃）下靜置40分鐘后觀察結果，（如果環境溫度太高，可置4℃環境下），在對照孔紅細胞顯著呈鈕扣狀時判定結果。 
7） 結果判定  將板傾斜，觀察紅細胞有無呈淚滴狀流淌。*血凝（不流淌）的抗原或病毒zui高稀釋倍數代表一個血凝單位（HAU）。 
2  血凝抑制（HI）試驗 
1） 根據HA試驗測定的效價，計算配制4個血凝單位(4HAU)抗原。以*血凝的病毒zui高稀釋倍數作為終點，終點稀釋倍數除以4即為含4HAU抗原的稀釋倍數。例如，HA效價為1:256，則4HAU抗原的稀釋倍數應是1:64（256除以4）。 
2） 加稀釋液： 
在微量反應板的第1～11孔加入0.025ml PBS，第12孔加入0.05ml PBS。 
3） 稀釋待檢血清： 
取1號待檢血清0.025ml加入*排第1孔，充分混勻后吸0.025ml于第2孔，依次對倍稀釋至第10孔，從第10孔吸取0.025ml棄去。 
取2號待檢血清加入第2排；取3號待檢血清加入第3排……均按上法稀釋。 
  注意！每取一份血清時，必須更換吸頭。 
4） 稀釋陰性血清： 
  在血凝板的第7排*孔加陰性血清0.025ml，對倍稀釋至第3孔，混勻后從該孔取出0.025ml棄去。 
    5） 稀釋陽性血清： 
  在血凝板的第8排第1孔加陽性血清0.025ml，對倍稀釋至第10孔，混勻后從該孔取出0.025ml棄去。 
6） 第1～11孔均加入含4HAU混勻的病毒抗原液0.025ml，在室溫（20～25℃）下靜置30分鐘或2～8℃ 50分鐘。 
7） 每孔加入0.025ml 1%（V/V）的雞紅細胞懸液，震蕩混勻，在室溫（20～25℃）下靜置20～30分鐘或2～8℃ 45～60分鐘，對照紅細胞將呈明顯鈕扣狀沉于孔底。 
結果判定  
以*抑制4 HAU抗原的zui高血清稀釋倍數判為該血清的HI效價。 
只有陰性對照孔血清滴度不大于2log2，陽性對照血清誤差不過1個滴度，試驗結果才有效。 
禽流感滅活疫苗的免疫效果判定：家禽免疫后21天進行免疫效果監測。禽流感抗體血凝抑制（HI）抗體效價≥24判定為合格 
存欄家禽抗體合格率達到≥70%判定為合格。 
新城疫免疫效果監測：免疫21天后，進行免疫效果監測。抗體血凝抑制試驗抗體效價≥25判定為合格 
存欄家禽抗體合格率達到≥70%判定為合格。